矛盾：免疫组化和基因检测突变的结果

以往的研究表明，EGFR拷贝数增加的NSCLC患者的生存时间较无EGFR拷贝数增加的患者短。我们通过FISH检测发现，在这组病例中47.6%（89/187）的患者存在EGFR基因拷贝数增加，EGFR基因的拷贝数增加与否与患者的年龄、性别、组织学类型、肿瘤大小、分期、是否转移及吸烟状况无关。但EGFR突变与拷贝数增加具有一定的相关性（P=0.012）。在EGFR突变阳性的患者中，大部分具有EGFR基因拷贝数的增加（65.8%, 25/38），而在EGFR基因扩增的患者中，亦有28.1%（25/89）的患者具有EGFR基因突变。

由于肺癌的发生是一个多步骤的过程，从癌前病变、原位癌到进展期癌最后发展为转移性癌。多位作者通过分析了不同阶段的肺癌组织后，提出突变是早期、侵袭前的改变；而拷贝数增加是晚期的、与侵袭相关的改变。因此，突变的发生早于拷贝数增加，而拷贝数的增加往往带有转移的表型。（这个的意思是不是说免疫组化阳性，则存在转移情况？）

【摘要】 目的探讨荧光原位杂交(FISH)技术和免疫组化(IHC)法检测石蜡标本非小细胞肺癌(NSCLC)EGFR基因扩增及蛋白表达水平的差异性。方法采用FISH和IHC分别检测27例NSCLC患者石蜡标本EGFR基因和蛋白表达,对2种方法的检测结果进行对比分析。结果 14例IHC法EGFR表达(3+)的标本中有9例FISH显示阳性(64.29%),其中5例为EGFR基因高多体性扩增(55.56%),4例为EGFR基因扩增(44.44%);6例IHC(2+)的标本中仅1例为高多体性扩增(16.67%);2例IHC(1+)及5例IHC(-)标本均无EGFR基因扩增。结论 IHC法初筛(3+)、(2+)的标本与FISH检测的符合率较低,提示对IHC检测EGFR表达为(3+)及(2+)并选择靶向药物治疗的病例,应采用FISH法对EGFR基因表达作进一步检测。

【摘要】 目的探讨非小细胞肺癌(NSCLC)表皮生长因子受体(EGFR)免疫组化表达与EGFR基因突变的关系及其临床意义。方法对130例手术切除的非小细胞肺癌组织应用免疫组化方法检测EGFR表达,同时应用基因测序方法检测EGFR基因突变,研究EGFR表达与EGFR基因突变的关系。结果130例NSCLC中有38例EGFR基因突变,突变率为29.2%。EGFR阳性率为67.7%。EGFR表达与基因突变无关(P>0.05),结论EGFR免疫组化表达与EGFR基因突变无关,不能作为筛选EGFR酪氨酸激酶抑制剂(TKI)治疗NSCLC的指标。 华为网盘附件：
【华为网盘】吉非替尼敏感性预测指标的研究现状.pdf
华为网盘附件：
【华为网盘】吉非替尼治疗晚期非小细胞肺癌疗效的相关分子生物学因素研究进展.pdf

目的:
　　 1.研究宫颈癌中表皮生长因子受体蛋白(Epidermal growth factor receptor,EGFR)的表达情况,并探讨宫颈癌中EGFR蛋白表达与临床病理特征的关系。
　　 2.分析宫颈癌病理组织中EGFR常见基因突变的发生率和突变类型,为临床针对EGFR的靶向治疗提供基因检测方法和理论依据。
　　 3.探讨EGFR蛋白表达与EGFR基因突变的相关性。
　　 方法:
　　 1.选取77例宫颈病理石蜡组织为样本,采用免疫组织化学法检测组织中的EGFR蛋白表达情况。
　　 2.选取86例宫颈癌患者的病理石蜡组织为样本,采用酚氯仿法抽提基因组DNA,分别运用聚合酶链反应(Polymerase chain reaction,PCR)技术及聚合酶链反应-限制性片段长度多态(Polymerase chain reaction-Restriction FragmentLength Polymophism,PCR-RLFP)技术对石蜡组织中的EGFR外显子19及21中常见基因突变进行分析,阳性结果再进行DNA直接测序验证。
　　 结果:
　　 1.EGFR蛋白在正常宫颈组织、宫颈原位癌及宫颈浸润癌组织中的阳性表达率分别为0,42.9％(6/14),76.7％(33/43),三组间差异具有显著性意义(x2=32.581,P<0.01),且两两间比较差异均具有显著性(P<0.01)。宫颈浸润癌EGFR蛋白表达与临床分期有关,随着临床分期的进展,EGFR的阳性表达率逐渐升高(P<0.01),与病理类型、年龄及病理分级无关(P>0.05)。
　　 2.经PCR,PCR-RLFP方法检测及DNA测序验证,宫颈癌中未检测到EGFR基因外显子19的缺失突变和外显子21的错义突变。
　　 结论:
　　 1.EGFR蛋白表达率随着宫颈组织恶性程度升高而升高,与临床分期有关,与病理分级、组织学分型及年龄无关。
　　 2.宫颈癌中EGFR基因外显子19及外显子21未检测到突变。
　　 3.EGFR蛋白高表达与EGFR基因第19、21外显子突变无关,可能与EGFR基因中其它突变相关。

目的 比较荧光原位杂交(fluorescence in-situ hybridization,FISH)技术和免疫组化法对非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)石蜡样本EGFR基因检测的结果,探讨EGFR基因表达状态与临床病理的关系.方法 收集手术切除的NSCLC标本50例,应用免疫组化EliVision法检测EGFR蛋白表达,FISH检测EGFR基因扩增水平,比较两种方法的检测结果.分析EGFR扩增情况与病理组织学分型、分级及淋巴结转移情况的相关性.结果 50例NSCLC中免疫组化检测EGFR阳性20例(40%),FISH检测阳性11例(22%),免疫组化检测强阳性的病例仅75%经FISH检出EGFR基因扩增,弥漫阳性的病例仅21.4%经FISH检出EGFR基因扩增,免疫组化与FISH检测结果一致性较低,而免疫组化检测EGFR阴性者有4例FISH检测显示EGFR扩增.EGFR扩增与NSCLC的病理组织学分型、分级及淋巴结转移均无明显相关性.结论 FISH检测EGFR基因扩增与免疫组化检测EGFR表达结果不相一致,其与临床病理之间的关系有待于进一步研究.

憨豆：

因此，就非小细胞肺癌而言，是否以易瑞沙或特罗凯作为开局的主力，可以
循以下的原则：
    1、基因突变的，毫不犹豫第一时间吃易瑞沙或特罗凯。
    2、基因不突变的，看免疫组化中的EGFR表达如何，(++)或(+++)的，首选
易瑞沙或特罗凯作开局主力。
    3、基因不突变的，免疫组化中的EGFR(+)或(-)，则不一定要选易瑞沙或特
罗凯作为开局的主力；如果VEGF(++)或(+++)，则可以选抑制VEGF一类的药作开
局主力；如果HER-2有(++)，则可选择BIBW2992作开局主力。
  
  免疫组化EGFR或VEGF有++或+++的，吃相应的靶向药，效果来得快，非常明
显，战果辉煌，但副作用很严重，靠一把眼泪一把辛酸地熬过来；至于那些一个
+号的，效果似乎不尽人意，CEA或AFP小降，肿瘤微缩或依旧，有点让人泄气，
但别忘了吃药时的舒服，吃着药也让人看起来像是个“没病的人”。此外，还有
一点更让那些基因突变或免疫组化高表达的人气结的：他们吃的靶向药效果虽然
来得明显且来得快，但耐药也非常快；免疫组化高表达的亦如此，往往也能一炮
中的，但打不了多少响就掉了靶。

    那些基因没变异的，免疫组化又低表达的，看似好像很吃亏，其实不然，他
们靶向药的有效使用期比那些基因变异的或免疫组化高表达的长得多，他们即使
不吃药，肿瘤进展也缓慢得多，而且，他们还赚了个吃靶向药舒服的便宜。所以
，这一切让人觉得合理，代价和战果成正关系。

   以下是几种换药模式：
    1、EGFR、VEGF、HER-2全都中高表达的，可以用易瑞沙、2992、特罗凯、凡德他
尼、阿西替尼、TIVO-1等任意换，只要让它们的类型间隔开就行。

    2、EGFR、VEGF、HER-2全都低表达的，可以用与上述相同的药，每种药都可以使
用时间稍长一些。

    3、EGFR高表达，VEGF低表达，HER-2无表达的，可用易瑞沙、特罗凯与阿西替尼、
TIVO-1等交替使用；易瑞沙和特罗凯用的时间稍长一些，阿西替尼、TIVO-1用的时间可
短些。

    4、EGFR无表达，VEGF高表达，HER-2无表达的，可以阿西替尼、TIVO-1等作主力，
用凡德他尼作短时间隔。

    以免疫组化表达指导选药，并不是百分百准确和一成不变；因为免疫组化的检测也
不一定很准确，因此，一切药物有没有效，要具体吃过才知道。有时即使没表达，也可
以在平稳的时候大胆尝试。

    此外，即使HER-2没表达，也不等于不能用2992、拉帕替尼一类的药，因为HER-2本
身也属于EGFR大家族里，抑制EGFR一类的药如果有效，用2992或拉帕替尼也大多有效。

    病情千变万化，不可能预先制定一套必定效果不错的换药程序，其实只要抓住大体
的换药原则，就可临时灵活处理，用上最恰当的药。


内科：
    保护肝细胞：水飞蓟宾胶囊(水林佳)
    降血压    ：络活喜
    降血小板  ：拜阿司匹林
    防腹痛腹泻：腹可安片
    治胃胀作呕：保和丸
    治感冒    ：加味藿香正气丸
    防心肌缺血：GNC牌辅酶Q10软胶囊(100毫克/粒)
    治肝胆郁热：白云山牌消炎利胆片
    …………

    外科：
    治甲沟炎早期：碘伏
    治口腔溃疡  ：复方氯己定含漱液
    治手足综合症：澳洲蜂胶、香港二天堂拔毒生膏肌等
    治皮疹      ：B6软膏
    防皮疹感染  ：百多邦
    治关节疼痛  ：香港黄道益活络油
    治肌肉疼痛  ：香港黄道益活络油

免疫组化染色按以下标准进行评估：①阴性（-），无棕色颗粒；②弱阳性（+），散在浅淡或细小棕色颗粒；③中等阳性（++），可见大的棕黄颗粒；④强阳性（+++），淡染色的棕黄颗粒分布较密集

由此图知：IHC 1+~2+,需检测突变。3+则可判定突变。

而我母亲是2+，但突变检测阴性。

学习了。。。。。。

还是有些不甘心，如果放弃掉易瑞沙这样的药。